ערכה זו משתמשת בטכנולוגיית הגברה איזותרמית של חומצות גרעין הפועלת בטמפרטורת החדר ובטווח טמפרטורות קבוע (בדרך כלל 39 מעלות -42 מעלות). התהליך מתחיל עם סינתזה של תעתיק הפוך (cDNA) של DNA משלים מתבניות RNA באמצעות פריימרים ספציפיים. הקומפלקס שנוצר על ידי רקומבינאז ופריימרים, בסיוע חלבוני עזר וחלבונים קושרים- יחיד, מחפש ונקשר לתחום ההומולוגי של המטרה. זה גורם להיווצרות של אזור לולאת D- באתר ההומולוגי, שמתחיל חילופי גדילים. ברגע שהרקומבינאז מתנתק, פולימראז נקשר לקצה ה-3' של הפריימר, ומתחיל הארכת שרשרת. הערכה משתמשת גם בפעילות אקסונוקלאז ובדיקות מולקולריות ספציפיות לניטור{10}}בזמן אמת של תהליך ההגברה באמצעות ציוד לזיהוי פלואורסצנטי.
【תכונות】
רגישות גבוהה
מיועד להגברת RNA מדויקת, המבטיח זיהוי מדויק.
מָהִיר
התגובה מסתיימת תוך 20 דקות בלבד, ומציעה הגברה מהירה.
יַצִיב
פורמט האבקה היבשה מפשט את הטיפול והאחסון.
תאימות רחבה
תואם למגוון מכשירי PCR כמותיים של הקרינה, מגברי הקרינה בטמפרטורה קבועה והתקני זיהוי פלואורסצנטי אחרים.
【עיצוב פריימר】
לביצועים מיטביים, אורך הפריימרים צריך להיות 30-35 bp. פריימרים קצרים יותר יכולים להשפיע על מהירות ההגברה והרגישות. הפריימרים נועדו להימנע ממבנים משניים שעלולים להפריע לתהליך ההגברה. אורך האמפליקון המומלץ הוא בין 150-500 bp.
【עיצוב פרוב פלואורסצנטי】
רצף הבדיקה אינו חופף לאתר זיהוי הפריימר הספציפי, האורך הוא 46-52 nt, והרצף נמנע מרצף פלינדרום, מבנה משני פנימי ובסיסים חוזרים ונשנים מתמשכים. ישנם ארבעה אתרי שינוי בבדיקה: dSpacer (tetrahydrofuran, THF) מסומן באמצע כ- 30-35 כ- 30-35 הקצה עבור ה- recogn't. אקסונוקלאז; קבוצה פלורסנטית מסומנת במעלה הזרם של אתר ה-THF, קבוצת מרווה מסומנת במורד הזרם, והמרחק בין שתי הקבוצות הוא 2-4 nt; THF נמצא במרחק של כ-15 nt מקצה 3', וקצה 3' מסומן בקבוצה חוסמת, כגון קבוצת אמינים, קבוצת פוספט או C3- Spacer.
【הרכב ערכה】
|
Cאומפוזיציה |
Cריכוז |
|
חוצץ |
1.6 מ"ל × 1 שפופרת |
|
חיץ B |
150 μL×1 Tube |
|
מֵגִיב |
48T |
|
מדריך מדריך |
1 העתק |
פֶּתֶק:בהתחשב בבעיית הפירוק של חומצת גרעין, מוצרי סדרת RNA אינם מספקים תבניות בקרה חיובית ובדיקות פריימר.
【מפרטי אריזה】
- מפרט: 48 T/חבילה
【Kזה אחסון】
- תנאי אחסון: יש לאחסן בטמפרטורה של פחות או שווה ל-20ºC בסביבת טמפרטורה קבועה. הרחק מאור והימנע מלחץ כבד.
- חיי מדף: 14 חודשים.
【פֶּתֶק】
- יש להוסיף פריימרים/פרובים בעיצוב עצמי- לפיתוח פרויקט MIRA.
- הערכה זמינה בשני סוגים - DNA ו-RNA. סוג ה-RNA כולל טרנסקריפטאז הפוך, המאפשר הגברה עם RNA, dsDNA ו-ssDNA כתבניות. סוג ה-DNA יכול להגביר רק עם dsDNA כתבנית.
- זמין בשלושה סוגים - Basic, Fluorescent ו-Test Strip. בחר את הערכה המתאימה בהתבסס על הצרכים שלך והשתמש בפריימרים/פרובים המתאימים.
תגיות פופולריות: mira rna ערכת הגברה מהירה איזותרמית פלואורסצנטי -ii, סין ערכת הגברה מהירה איזותרמית של mira rna -ii יצרנים, ספקים
